來源：博禾知道
2025-05-28 12:45 31人閱讀
血凝抑制試驗(yàn)是通過抗體阻斷病毒血凝素與紅細(xì)胞結(jié)合的原理檢測抗體效價的實(shí)驗(yàn)方法，核心步驟包括病毒血凝素與紅細(xì)胞凝集、特異性抗體中和病毒、剩余病毒與紅細(xì)胞反應(yīng)三個環(huán)節(jié)。
1、病毒血凝原理：
某些病毒表面血凝素蛋白能與紅細(xì)胞表面受體結(jié)合，導(dǎo)致紅細(xì)胞交聯(lián)形成可見凝集塊。這種現(xiàn)象是試驗(yàn)的基礎(chǔ)，如流感病毒血凝素可識別紅細(xì)胞表面的唾液酸受體。
2、抗體中和作用：
待測血清中的特異性抗體與病毒血凝素結(jié)合后，可阻斷病毒與紅細(xì)胞的連接。抗體濃度越高，能中和的病毒量越多，剩余具有凝集能力的病毒越少。
3、凝集抑制判定：
通過觀察紅細(xì)胞沉降模式判斷結(jié)果。完全抑制時紅細(xì)胞呈紐扣狀沉積，部分抑制呈鋸齒狀邊緣，未抑制則呈現(xiàn)網(wǎng)狀凝集。抑制效價以能完全抑制凝集的最高血清稀釋度為準(zhǔn)。
4、定量檢測設(shè)計(jì)：
采用系列倍比稀釋的待測血清與固定量病毒反應(yīng)，建立劑量-反應(yīng)曲線。該方法可精確測定抗體效價，常用于疫苗免疫效果評估和流行病學(xué)調(diào)查。
5、對照系統(tǒng)設(shè)置：
必須設(shè)立紅細(xì)胞對照（確認(rèn)無自發(fā)凝集）、病毒對照（驗(yàn)證凝集活性）、血清對照（排除非特異性凝集）和陽性對照（確保檢測系統(tǒng)有效性），以保證結(jié)果可靠性。
該試驗(yàn)需使用新鮮禽類紅細(xì)胞維持受體活性，操作時需控制pH值在7.2-7.4范圍。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配備生物安全柜處理活病毒，檢測急性期和恢復(fù)期雙份血清時，抗體效價升高4倍及以上具有診斷意義。對于高變異率病毒如流感病毒，需定期更新標(biāo)準(zhǔn)抗原以匹配流行株。
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