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基因測(cè)序是什么原理？

患者：男，33歲提問于2018-12-15 13:30

病情描述:
測(cè)取基因的順序用的是基因測(cè)序，它的原理是什么？

共2個(gè)回答

夏廷毅主任醫(yī)師去掛號(hào): 北京華信醫(yī)院 三級(jí) 放療科

DNA測(cè)序的方法有很多種，目前最常見的是雙脫氧終止法了。在測(cè)序用的緩沖液中含有四種dNTP及聚合酶，測(cè)序時(shí)分成四個(gè)反應(yīng)，每個(gè)反應(yīng)除上述成分外分別加入2,3-雙脫氧的A、C、G，T核苷三磷酸(稱為ddATP，ddCTP，ddGTP，ddTTP)，然后進(jìn)行聚合反應(yīng)。在第一個(gè)反應(yīng)物中，ddATP會(huì)隨機(jī)地代替dATP參加反應(yīng)一旦ddATP加入了新合成的DNA鏈，由于其3位的羥基變成了氫，所以不能繼續(xù)延伸。所以第一個(gè)反應(yīng)中所產(chǎn)生的DNA鏈都是到A就終止了。同理第二個(gè)反應(yīng)產(chǎn)生的都是以C結(jié)尾的，第三個(gè)反應(yīng)的都以G結(jié)尾，第四個(gè)反應(yīng)的都以T結(jié)尾, 電泳后就可以讀出序列了。

2018-12-15 14:26

張鞾副主任醫(yī)師去掛號(hào): 江蘇省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院 三甲 腫瘤科

這個(gè)測(cè)序法，加了四種材料進(jìn)去，ddT、ddA、ddG、ddC，能和原始的DNA序列配對(duì)，但因特殊的結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致復(fù)制終止。測(cè)定過程中，將待測(cè)樣品分為4份，每份中加入一樣改變后的材料。結(jié)束后，第一份中所有片段全是以ddT為終端的不同長(zhǎng)度的序列，以此類推形成了長(zhǎng)度不同，可以分辨出長(zhǎng)短不同的序列，然后在看看這個(gè)序列對(duì)應(yīng)的添加的材料是哪一種，就能按照序列的長(zhǎng)短來確定相應(yīng)的脫氧核苷酸了。

2018-12-15 14:26

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