如果懷疑自己已經(jīng)染上了灰指甲,但是反復進行直接鏡檢法和培養(yǎng)法均為陰性時,可以采用甲標本的組織病理學檢查,提高診斷率。另外,有時真菌僅附著于甲床上,沒有侵入性的,而培養(yǎng)時可為陽性,但有可能實際上是假陽性,用組織病理學檢查就可以了解真菌是否真的有致病性。
1.PAS染色法
采用不累及甲床的方法獲取甲標本,如用鑷子或者甲鉗子獲得部分病甲或全部病甲甲板。然后將標本置于4%的福爾馬林溶液內(nèi),然后置于含氯化汞、硝酸、鉻酸、95%乙醇及水的溶液中浸泡2天進行軟化,分別在70%乙醇、95%乙醇、二甲苯液中洗3小時,或者標本置于10%吐溫40溶液中浸泡一整夜進行軟化,然后用石蠟包埋后切片,采用PAS染色。在40×的高倍鏡下觀察,可以清楚的看見紫紅色真菌的形態(tài)即菌絲和孢子。
2.電子顯微鏡觀察
本方法目前不作為灰指甲檢查的常規(guī)方法,對于臨床上認為是灰指甲,但是采用常規(guī)方法未能檢測出真菌的,可以使用電子顯微鏡觀察。結(jié)果顯示電子顯微鏡可以大大地提高甲真菌病的診斷率,還可以觀察真菌的侵襲情況。
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